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楼主  发表于: 2018-06-20 14:04

 给细胞培养实验来点小技巧


细胞培养在飞速发展的生物科学领域具有举足轻重的地位,尤其在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。细胞培养不仅与各种现代生物技术密切相关,而且在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。对于细胞培养,培养基的质量是关键,而培养基的主要成份动物血清,更是重中之重。  
胎牛血清(fetal calf serum ,简称FBS)是动物血清中品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取胎牛血清。
  血清的主要作用
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的蛋白质、多肽、激素等营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能:
1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
  血清保存和使用注意事项
血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
先达基因支原体检测试剂盒提供了一种快速简单灵敏的细胞支原体检测方法,能检测的支原体种类超过130种,两步操作,20min出结果。先达基因支原体检测,从未如此简单。
  如何辨别真假血清?
由于血清高需求量和高利润,中国市场上进口血清是极其混乱的,高仿假货泛滥。为了实验顺利进行,大家有必要擦亮眼睛(参考各方的意见):
一:价格:进口的正品血清价格都超过5000,少于这个价的不敢苟同。当然也不排除是某些代理去年囤积了不少货。
二:如果有不熟悉的经销商在血清,价格也和市场价差不多,那我怎么知道他卖的是不是假货呢?遇到这种情况,我建议首先搞清楚对方公司性质,是经销(倒货,串货多些)还是正规代理!如果他说是代理 ok,请他出示授权书,或者你可以直接电话给gibco或hyclone公司询问!如果你已经买了,呵呵~那只能通过事实来说话了,如果细胞养的很好,都没问题,那恭喜你买的正品,如果养不出来(一般高仿用的血清大多为小牛血清,养普通肿瘤细胞还可以),检查实验过程,做对照,看看是不是血清的问题,接下来找厂家吧。
三:目前高仿/水货/正品血清在外观上基本上可以做到一模一样,所以外观很难辨别,颜色为:近半透明的淡黄色。如果无法比较,可以看瓶子上的生产批号上网查询。
动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要甚至是难以替代的作用。保证血清质量也是促进细胞生长和生物制品质量提高的重要环节。
文章来源:英格恩技术的官方博客,原文见:细胞培养该不该加抗生素
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