2015年下一代测序技术(NGS)取得了长远的进步。技术的进步使研究人员可以获得更长读长的序列,配合生物信息学,将获得更丰富的基因组信息。
根据最新的DeciBio市场报告显示,测序仪器市场规模已达24亿,预计到2019年将增长到45亿。临床客户是这一增长的主要推动力,科研市场则受单细胞测序、群体遗传学和NGS应用的驱动。本文回顾了几家主要的测序仪制造商在过去一段时间里的动向,并对2016年进行展望。
PacBio的逆转:Sequel测序仪
过去几年,PacBio公司对RSII测序系统读长、通量、生物信息分析和应用等方面做了大量的改进工作。然而,该仪器的价格高达69.5万美元,体积大也阻碍它的广泛采用。
Sequel测序仪的推出标志着PacBio的逆转,与RSII系统相比,它的测序通量提高了7倍,价格下降到35万美元,体积只有约1/3。
2015年PacBio预期售出10台Sequel测序仪,大部分卖给了罗氏公司,罗氏准备使用Sequel来开展临床测序。西奈山伊坎医学院的伊坎基因组学及多尺度生物学研究所(IcahnInstituteforGenomicsandMultiscaleBiology)和贝勒医学院也都订购了Sequel。
华盛顿大学基因组学教授Shendure说,如果Sequel性能继续提升,其低成本和长读长测序的优势,将有助于科研人员进行更全面的突变研究。Sequel将大有作为。该仪器甚至可提供“铂金品质的基因组”,他将此定义为接近人参考基因组的质量。
英国癌症研究所基因组组长JamesHadfield说,如果PacBio继续改善装载效率并降低测序成本,它会成为一个真正的竞争对手。“如果能用PacBio的仪器花费5000美元得到基因组,那真的很棒”,尽管这个价格仍然比Illumina公司基因组测序的价格贵,但它能提供更大的长度范围和结构信息。
罗斯林研究所ARK基因组中心主任MickWatson预测,未来一年Illumina公司的测序仪结合PacBio公司Sequel测序仪的使用,将会产生更多全基因组测序结果,可深度了解结构变异和短读长技术测不到的基因组区域,例如,HLA区域、重复元件和着丝粒。另外,他补充说,由于长读长在观察结构变异上的优势,“人们将开始使用Sequel测序癌症基因组。”
然而,博德研究所的ChadNusaum说,Sequel的成功将取决于数据的质量,目前尚没有公开相关数据。
OxfordNanopore公司:MinIon试用
OxfordNanopore公司去年推出了MinIon纳米孔测序仪早期试用计划。自那时起,该计划已经扩大,几个团体发表了大量研究,证明了MinIon协助基因组装配,以及在标准实验室外快速测序微生物基因组和环境样本的潜力。
美国NASA约翰逊太空中心的研究人员计划在2016年把MinIon带到太空,测序国际空间站的样本。一些研究者认为,MinIon可用于即时检测(POCT),例如,快速检测以诊断一个未知感染,对疾病暴发如西非埃博拉暴发的实时分析。
Oxford公司能否超越PacBio公司仍然有待观察。Watson说,PacBio公司有客户群和成熟的技术。MinIon和即将推出的PromethIon仍处于发展阶段,但Oxford公司的技术有巨大的潜力。
华大基因的战略变化
6月,华大基因基于CompleteGenomics的技术推出了一款高通量测序仪Revolocity。当时,CompleteGenomics公司的CEOCliffReid介绍,Revolocity每年可测序1万个人类基因组,等同于Illumina公司的HiSeqXTen。尽管华大基因计划2016年上半年才交付Revolocity测序仪,但它已经提前有了三个客户:荷兰奈梅亨大学医学中心、澳大利亚健康服务公司Mater和英国癫痫协会。
但在11月,华大基因搁置了该测序系统的商业化。Reid将辞去CompleteGenomics公司CEO的职务,华大基因把重心放在了桌面测序仪BGISEQ-500上,计划使其通过中国食品药品监督管理局的认证。这是继王俊离开后华大基因经历的另一次大变动。
Watson推测,Revolocity可能过于复杂,不利于商业化。
****默飞:改善服务
****默飞(ThermoFisherScientific)公司基于其IonTorrent技术,推出了一款新的NGS系统——IonS5,专注于“即插即用”的靶向测序。该公司还根据其AmpliSeq技术开发了靶向panels,特别是针对癌症领域。展望未来,靶向测序可能成为****默飞有利可图的方向,它正努力实现扩大Proton测序仪规模的目标。
DeciBio的市场报告中写道,由于PII芯片面临的技术难关,****默飞所占的市场份额有所滑落。随着公司将重心从增加通量转变为改善服务临床客户的工作流程,其发展将以每年约17%的速率增长。
对2016年的预测
展望2016年,单细胞测序技术的进展,10XGenomics公司的技术潜能,和大规模测序项目产生的基因组数据都让研究人员们兴奋。
Shendure说:“捕获、区室化和标记的技术进步非常快速,可以告诉我们哪些序列来自同一个细胞”。这些技术包括10XGenomics的技术,可以快速分析上千个单细胞表达谱的Drop-Seq技术,Shendure实验室正在开发的可创造数千个标记的DNA池的CPT-seq技术。
Hadfield谈到了单细胞基因组学、基因组定向和自动化。他说:“这些技术使我们能构思更复杂的实验,是我期待的下一次技术革命”。
若干临床测序项目正在进行中。Shendure说:“监管方面的挑战已经越来越明显。最重要的找到最适合患者的方法,2016年这方面一定会有所进展”。
另外,Illumina公司依然是NGS市场的主导者,但由于MiSeq和NextSeq测序仪的销售不佳,其第三季度的收益不如预期。专家预测2016年Illumina公司会有重大创新。愚愚学园
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