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楼主  发表于: 2016-01-07 09:04

 HCV检测方法盘点

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丙型肝炎病毒感染是急性和慢性肝病的常见病因,通常临床症状不明显。然而,慢性丙型肝炎可导致肝硬化、终末期肝病疾病和肝细胞癌。丙型肝炎病毒检测在诊断、分类及丙型肝炎病毒疾病管理中起着重要作用。

HCV感染检测方法

下列检测方法可用于诊断和管理丙型肝炎(HCV)感染:

▲ 血清学检测:检测血清或血浆中的丙型肝炎病毒特异性抗体 (抗-HCV),报告阳性或阴性结果。

血清学检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV),用于筛查与诊断丙型肝炎病毒感染,结果报告为抗-HCV阳性或阴性。美国食品与药物管理局 (FDA) 批准了3种不同的临床应用检测方法,雅培HCV酶免疫测定 (EIA) 2.0、ORTHO HCV酶免疫法 3.0 (ELISA)及 VITROS 抗-HCV检测。上述检测方法均具有较高的特异性与敏感性(敏感性大于99%,特异性为 99%)。

阴性检测不足以排除慢性HCV感染。血液透析患者与免疫功能缺陷患者都可能出现假阴性结果,而自身免疫性疾病患者可能出现假阳性结果。

▲ 分子检测:检测病毒核酸,分为定性检测或定量检测。病毒载量的数量单位IU/mL。

分子检测经FDA 批准用于HCV RNA检测;分子检测包括:定性检测 (如,Amplicor HCV v2.0,Cobas HCV v2.0,Versant HCV RNA,Procleix HIV-1/HCV检测) 或定量检测(如,Amplicor HCV检测,Cobas Amplicor HCV检测v2.0、CobasTaqman HCV检测)。

定性试验用于检测是否存在HCV RNA (特异性约为98%) ,定量检测用于检测具体的病毒载量(特异性约为98-99%) ,并提供足够的信息以指导临床医生管理及监视治疗转归。

上述两种类型的检测均可用于识别急性或慢性HCV感染。急性HCV感染暴露2周内,可在血清中检测到HCV RNA。另一方面,可能需要大约 8-12 周才会出现抗-HCV阳性结果。

然而,未进行HCV RNA检测时,抗-HCV阳性结果可见于病毒性清除期的急性感染,可能会导致假阳性结果;这也可能发生于HCV感染恢复与HCV感染后的自发缓解。

▲ 基因型测定:在流行病学研究中作用重大,临床上用于预测应答的可能性和治疗持续时间;基因型测定帮助临床医生将病毒分为 6 主要基因型。

HCV RNA 基因分型方法较多,国内外在抗病毒疗效考核研究中,应用Simmonds等1~6 型分型法最为广泛。HCV RNA基因分型结果有助于判定治疗的难易程度及制定抗病毒治疗的个体化方案。

血样收集

使用血清分离胶管或血清分离采血器收集3.5 ml血液。患者不需要特殊准备。血液样本允许凝结;血液样本应进行离心和冷藏或冷冻,以便于运输和稳定。

成年人HCV RNA 聚合酶链反应 (PCR) 检测,应使用EDTA管收集 4-6ml血液。婴儿收集2 ml血液;新生儿应收集整管血液。

收集血液后,血样必须立即送往是实验室处理。实验室人员在6 小时内采用离心法将血浆从全血分离。

针对HCV基因分型,使用EDTA 管收集 6 ml患者的血液样本。血浆必须在4小时内进行分离和冷冻;为了方便运输与稳定,血液必须进行离心及冷冻。



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