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楼主  发表于: 2017-02-27 10:03

 Q-PCR的绝对定量问题

如题,我实验中需要对三个目的基因进行绝对定量,得出浓度是多少copies/ml,打算选择16S作为管家基因,我想了两种方案进行定量,各位大神们帮我看下是否可行:1.购买16S的标准品,对水体中16S进行绝对定量,然后以16S作为管家基因,对目的基因进行相对定量,根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数;2.利用Fish技术设计16S的探针,直接检测水体中16S的浓度,然后以16S作为管家基因,对目的基因进行相对定量,根据二者的比值计算出目的基因的拷贝数。因为我只做过相对定量Q-PCR,绝对定量Q-PCR和Fish都没有做过,就不知道这样是否可行,求教做过的分子生物学大神们!
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