来源：生物谷 2015-02-28 18:03
2015年2月28日 讯 /生物谷BIOON/ --类风湿性关节炎是一种十分常见的自身免疫疾病，临床上的特征以及治疗反应的特异性受到包括遗传，环境以及免疫因素等多方面的影响。然而这些因素并不能很好地适用于治疗方式的预测。目前一线的治疗类风湿关节炎的药物是低剂量的氨甲喋呤（MTX）-一类叶酸代谢抑制剂，然而有相当一部分患者对此类药物的治疗效果并不明显，原因未知。由于除了抗叶酸代谢之外，MTX还能够促进腺嘌呤（ADO）在胞外的积累，而ADO的产生与Treg表面的CD39/CD73具有密切的联系。巴西圣保罗大学药学系的Fernando Q. Cunha研究组针对此问题研究了Treg表面CD39与MTX的抗自身免疫病的关系，相关结果发表在最近一期的《PNAs》杂志上。
首先，作者随机收集了接受MTX药物治疗的122名RA患者样本，其中69位对MTX治疗效果不明显（UR-MTX），57位对MTX治疗效果明显（R-MTX）。另外还有33名健康人作为对照样本。通过细胞特征分析，作者发现R-MTX患者样本中Treg的数量与比例要明显高于另外两组，说明MTX的疗效与Treg具有一定的联系。进一步研究发现，R-MTX患者体内CD39+ Treg明显多于其它两组。而且通过定量分析Treg表面的CD39的表达量，作者发现UR-MTX患者Treg细胞表面的CD39表达水平要明显低于R-MTX患者以及健康人。同时CD73的相关分析呈阴性。
之后，作者分析了UR-MTX患者体内CD39的地表达量与ADO生成及释放之间的联系。作者将患者与健康人的Treg以及Tcon细胞分理出来进行体外培养，同时加入ADP进行共同孵育。一段时间后通过HPLC的方式检测上清中ADO的产生量。结果显示，相较于R-MTX以及健康人，UR-MTX患者Treg生产ADO的能力受到了很大程度的阻碍。而各组样本中Tcon细胞产生ADO的能力之间没有明显差异。另外，作者通过体外共培养Treg与Tcon的方式检测了Treg对于CD3/CD28作用下Tcon增殖的抑制作用。结果显示，相对于R-MTX以及健康组，UR-MTX组的Treg抑制细胞增殖的能力明显偏弱。
之后，作者分析了CD39在Treg表面的低表达是UR-MTX患者本身的特征还是接受MTX后产生的应激反应。首先，作者证明使用MTX进行治疗并不是造成MTX耐药性的原因。另外，在MTX之前，UR-MTX患者与R-MTX患者体内Treg的数量与比例并没有明显差异，而在使用之后，R-MTX组的Treg较UR-MTX组发生明显的上升。同理，CD39+Treg的比例也具有相似特征。以上结果说明MTX的抗炎症机制与Treg的扩增具有因果关系。之后，作者通过比较MTX前后不同组的Treg表面CD39的表达量，发现不论与否，R-MTX组Treg表达量远高于UR-MTX组。以上结果说明Treg表面CD39的表达量是个体自身具有的一种特征，而且影响了MTX治疗RA的效果。
最后，作者通过小鼠关节炎模型证明了MTX是通过Treg以及CD39发挥作用的假说。
这一研究的意义在于：一方面揭示了MTX治疗RA的一种分子机制，并对不同患者对MTX的治疗效果差异做出了解释；另一方面对临床上进行RA治疗方案选择上增加了一种可供参考的分子标记，即CD39的表达水平。（生物谷bioon.com）
