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楼主  发表于: 2016-12-20 10:42

 非淋菌性尿道炎病原学诊断专家共识

长期以来,传统的培养法以及免疫学方法诊断 非淋菌性尿道炎( nongonococcal urethritis,NGU) 病 原体存在一定程度的漏诊或误诊。随着诊断技术的 不断发展,分子诊断已普遍应用于临床,包括 DNA 检测和 RNA 检测等技术都为诊断这些病原体提供 了更好的方法。为规范此类疾病的诊断程序,提高 疾病诊断水平,中华医学会男科学分会组织国内相 关专家经过多次讨论,制订了 NGU 病原学诊断专家 共识。

    本文节选部分内容,全文可见非淋菌性尿道炎病原学诊断专家共识。

    实验室诊断方法

    CT检测

    细胞分离培养法

    CT 直径介于病毒与立克次体之间,为原核细胞型微生物,能通过滤菌器,有 独特生活周期。一直以来,细胞分离培养法被认为 是金标准方法,其需要用 HeLa 229 细胞、McCoy 细胞或鸡胚卵黄囊接种、分离培养鉴定 CT。但是由 于分离培养操作复杂、技术及设备要求高、所需时间 长和敏感性受标本采集等限制,难以作为临床常规 检查和流行病学筛查,只能作为其他方法的参考标 准应用。

    免疫学检测

    常�*************************庖哐Х椒ㄓ兄苯佑� 抗体试验( DFA) 和酶联免疫法( EIA) ,这两种方法的特点是: ①适用于多种类型的标本; ②特异性和敏 感性较培养法高,但判定结果带有主观性; ③对操作 有较高要求,不适用于大量标本的检测。

    近年来发展的胶体金免疫法较传统的免疫方法 应用很广泛,其优点是简易、方便、快速,操作简便, 并可就单一标本立即检测,缺点是敏感性仅为细胞培养法的 75% ~ 88%[63-64]。

    分子生物学检测

    在目前所有检测方法中, 分子检测技术灵敏度和特异性最好,是首选的检测方法。分子生物学检测主要有 DNA 和 RNA 检测两大类。

    DNA 检测技术主要包括了聚合酶链反应( polymerase chain reaction,PCR) 和连接酶链反应( linkchain reaction,LCR) 。PCR 电泳因其检测结果存在 假阳性而导致特异性下降; 而荧光定量 PCR 杂交法、PCR 微孔板杂交法及套式 PCR 等方法,较好地 解决了敏感性和特异性问题。LCR 法可解决 PCR 中存在的假阳性问题,敏感性也有所提高; 同时,标本可以用尿液或拭子,减轻了患者的痛苦,易被接 受,是一种较好的检测方法。

    目前检测CT最好的方法是RNA检测。RNA检测主要包括SAT( simultaneous amplification and testing,SAT) 和 TMA( transcription-mediated amplification,TMA) 技术,这两种技术的扩增仪原理完全相同。由于 RNA 在非病毒性病原体微生物细胞中存 在多拷贝( 其16SrRNA在每个细胞中多达104拷贝) ,与以 DNA 为靶标的 PCR 等技术相比,其灵敏度和准确性更高,并且可以检测包括尿液在内的各 种样本,且不同部位的样本结果一致性很好。研究表明,在男性患者中,尿液和尿道拭子 RNA 检测结 果的一致性几乎可达 100%。另外,由于RNA只存在于活的细菌中,所以RNA检测结果可以用于 疗效判断,符合目前精准医疗的要求,是目前为止最好的检测方法。

    MG检测

    培养法

    MG的传统检测方法是用SP4培养基培养1~5 个月,易污染,且要观察SP4培养基颜色的变化来判断,难以客观评价结果,因此难在临床应用。Vero 细胞培养法约3周左右,仍因其所需时间过长、培养过程中菌株容易死亡等原因,不适用于临床快速检测。

    免疫学检测

    MG与某些微生物( 如肺炎支原体)有交叉抗原,故免疫学检测方法受到一定限 制,免疫法的敏感性和特异性都比较低。 Jurstrand 等基于脂结合膜蛋白的酶联免疫吸附 试验检测法( LAMP-ELISA) 虽然具有较高的种属特异性,但其检测结果随时间波动较大,影响因素较多,亦较难应用于临床诊断。

    分子检测法

    目前用于MG检测的主流方法是分子生物检测,DNA和RNA检测都已应用于MG的临床检测。RNA检测MG目前仅有SAT技术。与CT检测类似,RNA 检测具有取样方便、灵敏度高、特异性好且可用于疗效判定等优点,是MG检测的首选方法。
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