支原体:又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。
支原体是在1898年发现的,又称人形支原体,是一种简单的原核生物。其大小介于细菌和病毒之间。结构也比较简单,多数呈球形,没有细胞壁,只有三层结构的细胞膜,故具有较大的可变性。支原体的大小为0.2~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小(直径0.1~1.0mm),在固体培养基表面呈特有的"油煎蛋"状。无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性,对渗透压敏感,对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。
在细胞培养过程中应当定期做支原体检测,万一细胞已受支原体污染时,最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。但是若受污染的细胞比较珍贵,必须去除支原体污染,则可以通过混合使用抗生素以达到目的。支原体没有细胞壁的,传统的抗生素一般对其无效。培养细胞支原体污染虽然不对细胞产生急性毒性作用,但可使细胞性状发生改变而影响细胞脂质体的转染和病毒对靶细胞的感染。包装细胞与靶细胞支原体污染的有效清除能明显改善病毒包装时的转染效率及靶细胞感染效率。
目前先达基因的支原体检测试剂盒采用核酸恒温荧光检测方法,检测支原体灵敏度高,30min检测出结果,非常适合常规细胞培养中的支原体检测。
同时如果出现相关污染而细胞又特别宝贵不能丢弃的,可选用专门的支原体清除剂,去除细胞培养中的支原体污染,采用双重杀菌机制,不易产生耐药,可杀灭细胞内寄生的支原体,不反复干扰,使用方便,直接加到培养基中即可。